脂質體2000轉染法的原理說明

 　　脂質體2000是陽離子脂質體N-[1-2，3-Dioleyoxy， Propyl]-n， n，n-Trimethylammonium Chloride(DOTMA)和Dioleoyl photidye-thanolamine(DOPE)的混合物[1：1(w/w)]。它適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中，是目前條件下zui方便的轉染方法之一。轉染率高，優于磷酸鈣法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA轉染到各種細胞。

　　用LR進行轉染時，首先需優化轉染條件，應找出該批LR對轉染某一特定細胞適合的用量、作用時間等，對每批LR都要做：*，先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細胞相互作用的時間，DNA可從1~5μg和孵育時間6小時開始，按這兩個參數繪出相應LR需用量的曲線，再選用LR和DNA兩者*的劑量，確定出轉染時間(2~24小時)。因LR對細胞有一定的毒性，轉染時間以不超過24小時為宜。

　　細胞種類：COS-7、BHK、NIH3T3、Hela和Jurkat等任何一種細胞均可作為受體細胞。

　　脂質體2000轉染方法原理

　　脂質體2000轉染方法原理：脂質體2000作為體內和體外輸送載體的工具，已經研究的十分廣泛，用合成的陽離子脂類包裹DNA，同樣可以通過融合而進人細胞。使用脂質體將DNA帶人不同類型的真核細胞，與其它方法相比，有較高的效率和較好的重復性。

　　中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA，借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。帶正電的陽離子脂質體，DNA并沒有預先包埋在脂質體中，而是帶負電 的DNA自動結合到帶正電的脂質體上，形成DNA-陽離子脂質體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經過內吞被導入細胞。